硫酸铵沉淀法

2025-07-26 理际环保 134

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硫酸铵沉淀法是一种基于盐析效应的蛋白质纯化技术,通过调节硫酸铵浓度使目标抗体因溶解度差异选择性析出。其原理是利用高浓度硫酸铵破坏蛋白质水化膜,维持生物活性同时实现分离 。该方法适用于腹水、血清等样本,常用33%-50%饱和度分段沉淀,操作包含梯度加盐、低温搅拌、离心分离及透析去盐等步骤 。

该方法发展过程中形成了分段盐析策略:采用0%-30%、30%-60%、60%-80%浓度梯度分步沉淀,通过离心和透析获取目标蛋白富集区间。实践中常与辛酸沉淀、层析技术联用以提升纯度,如两步法可将抗体纯度提升至75%-80% 。改良方法在卵黄抗体纯化中验证了其经济性与高效性,并获得电泳纯级抗体。操作需控制pH(4.5-5.5)、缓冲液浓度及温度(0℃溶解度676g/L),避免局部浓度过高导致蛋白变性。